· polyacrylamideဂျယ်လ်သည် acrylamide monomer, polymerization အစ, ဓာတ်ကူပစ္စည်းနှင့်ဆားနှင့်ကြားခံအရောအနှော၏ညာဘက်) မှရရှိရမည်။
· acryonternideနှင့် bis (n, n '- methylene နှစ်ဆ acperamide) သည် Monomer Form Gel Matrix ဖြစ်သည်။
ammonium person polymerization လုပ်ငန်းစဉ်ကိုစတင်ပါ။ ကော်၏ရေးဆွဲရေးသည်ရေတွင်ပြင်ဆင်ထားသော 10% ammonium possultate ဖြေရှင်းချက်လိုအပ်သည်။ သတင်းအချက်အလက်အများစုသည်တက်ကြွစွာအသုံးပြုရန်လိုအပ်ကြောင်းဖော်ပြခဲ့သည်။ သို့သော် 10% သောဖြေရှင်းချက်ကို 4 the ℃℃℃တွင်အရေးမကြီးပါ။ 10 ml အထိလုပ်ပြီးကော်စုစုပေါင်းမအောင်မြင်သောအခါဖယ်ထုတ်ပါ။
ထိပ်ဖျား: ၏ရာခိုင်နှုန်းacryonternideကော်ကော်နှင့်ပရိုတိန်းကော်များတွင်မတူပါ။ Premade acrylamide ကိုအသုံးပြု။ BIS ဖြေရှင်းချက်ကိုအသုံးပြုပါကမှန်ကန်တဲ့ပုလင်းကိုသေချာအောင်လုပ်ပါ။
· Temed (N, N, N '- Tetramethyl Ethylediamine) သည်ရေခဲသေတ္တာထဲတွင်နေရာချသည့်အညိုရောင်ပုလင်းတွင်ဓာတ်ကူပစ္စည်းဖြစ်သည်။ ကော်မလောင်းမီထည့်ပါ။
· polyacrylamerlamerlamerlamerlamerlamer သူ Electrophoresis အသုံးပြုသော electrophoresis ရှိ Electrophoresis ရှိဖန်ခွက်များကိုအချိန်တိုင်းနှင့်အပြီးဆေးကြောသင့်သည်။ Electrophoresis ပြီးနောက်, ပျော့ပျောင်းသောစုတ်တံနှင့်အထည်ပူပြင်းသောရေပူနှင့်အတူဆေးကြောပါ။ ရေစက်ရေနှင့်သုတ်ခြင်းနှင့်ခြောက်သွေ့ပါ။
·အစိုဓာတ်နှင့်ဖုန်မှုန့်များသည်ဆွန်းပိုလီမာနှင့်အတူဖြစ်စေနိုင်သည်။ Electrophoresis မတိုင်မီ, ဖန်သန့်ရှင်းစင်ကြယ်သောဖန်ခွက်ပြားကိုသန့်ရှင်းရေးလုပ်ပါ။ ရေစက်ရေနှင့်အတူဆေးကြောပြီးစက္ကူသုတ်နှင့်အတူနှိုက်နှိုက်ချွတ်ချွတ်ခြောက်သွေ့။ စက္ကူနှင့်မသုတ်မီ 70% အီသနောနှင့်ဆေးကြောခြင်းဖြင့်ခြောက်သွေ့ခြင်းနှင့်အရှိန်မြှင့်ရန်ကူညီသည်။ Acryamide အဆက်မပြတ်နမူနာများထည့်သွင်းခြင်း Bis, Water, Buffer Solution, ammonium pelfate, Temed ။ ကောင်းစွာလှုပ်ခါနှင့်ချက်ချင်းငါသွန်းလောင်း။
polymerization မတိုင်မီ polyacrylamide ရန်မလိုအပ်ပါဘူး။ (acrylamide ကိုလေဟာနယ်ထဲကိုလေဟာနယ်ထဲထည့်ရန်လေဟာနယ်ထဲကို 0 င်ရောက်လေ့ရှိပြီး Bubbles များကိုဖယ်ရှားရန်အသုံးပြုသည်။
အလျားလိုက်ကော် point နမူနာအကြံပြုချက်များ။
·အောက်ခြေအကွက်ရှိအနက်ရောင်စက္ကူတစ်ရွက်ကိုအောက်ခြေအကွက်တစ်ခုတွင်ထည့်ပါ။
· colloid ကိုကျော်။ ကော်ဆိုက်ကော်ထိုး Buffer ။
ection သည်အစွန်းတွင်အလင်းရောင်ရှိပါကအလင်းကိုဖွင့်ပါ, အလင်းသည် colloid ကိုလင်းစေပါ။ နမူနာကို pipette သို့ဆွဲပါ။
a automatic pipetting device ကို သုံး. ။
· 10-200 Mu 1 တွင် Mu 1 အရည်ရွေ့လျားမှုအမှတ်အသားအများစုတွင်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ အလွန်သေးငယ်သောနမူနာအပေါက်များ (10μ1ထက်နည်းသော) အတွက် sequencing ကော်များအတွက်အသုံးပြုသောရှည်လျားသော pipette ခေါင်းသည်ပိုမိုအဆင်ပြေသည်။
pipetting သည်နမူနာတွင်နှစ်မြှုပ်ခြင်း, ဖြည်းဖြည်းချင်းရွေ့လျားနေသောအရည်ကိုရှူမိသည်။ နမူနာသည် glycerin နှင့်စေးကပ်နေပုံရပြီးလျင်မြန်စွာရေတာသည်လေပူဖောင်းများကို pipette ခေါင်းပေါ်သို့ဆွဲဆောင်နိုင်သည်။
·နမူနာနမူနာများသည်ပိုက်လိုင်းကိုရှူရှိုက်မိပါကပိုက်၏အစွန်းပေါ်ရှိအရည်ခေါင်းကိုညင်ညင်သာသာသို့မဟုတ်စက္ကူများအပြင်ဘက်တွင်စက္ကူခေါင်းကိုသုတ်ခြင်း။ နမူနာကိုမစို့ရန်သတိထားပါ။
နမူနာကိုနမူနာအပေါက်ထဲသို့ထည့်ပါ
· pipetting ကိရိယာအနည်းငယ်ကိုဖိအားပေးရန်နမူနာများကိုအနည်းငယ်ရွေ့လျားစေပါ။
·အစက်အပြောက်တွင်းများထက်အနည်းငယ်ပိုမိုမြင့်မားသောကြားခံထဲသို့ထည့်သွင်းခြင်း, pipette ၏အစွန်အဖျားကိုသေးငယ်တဲ့အပေါက်တစ်ခုသို့ထည့်သွင်းနိုင်ပါတယ်။
·ဖြည်းဖြည်းနှင့်တဖြည်းဖြည်းနမူနာထွက်။ pipette tip ကိုအမှတ်နမူနာအပေါက်အထက်တွင်ထားပြီးနမူနာနမူနာသည်တွင်းထဲသို့နစ်မြုပ်လိမ့်မည်။ နမူနာကိုတွန်းအားပေးမည့်အစားနမူနာအပေါက်ကိုဖြည့်ရန်နမူနာစုပ်ပါစေ။
·အရည်ခေါင်းနှင့်အတူနမူနာနမူနာသည်ဒုတိယအချက်ဒုတိယခြေထောက်သို့ပြောင်းရွှေ့ပါလိမ့်မည်။
ဒေါင်လိုက်ကော်နမူနာကိုဘယ်လိုလုပ်ရမလဲ။
·ဖန်ခွက်နှစ်ခုအပိုင်းပိုင်းအကြားဖွဲ့စည်းထားသောဒေါင်လိုက်ကော်ပိုဒ်နမူနာအပေါက်များ။ အလွန်ပါးလွှာသောကော်များတွင် pipette ခေါင်းကိုဖန်ပြားပြားနှစ်ခုအကြားပင်မထည့်နိုင်ပါ။ အဆိုပါ glycerin စောင့်ကြည့်! pipette ခေါင်းကိုနမူနာအပေါက်ကိုကျော်သွားပါ။ နမူနာနမူနာသည်တွင်းထဲသို့နစ်မြုပ်လိမ့်မည်။
·အရင်အမှတ်အသားမပြုမီ polypropylene acyl ဂျယ်လ်နမူနာအပေါက်ကိုဆေးကြောသန့်စင်ထားသည့်ဒေါင်လိုက်ထားပါ။ နမူနာအပေါက်၏အောက်ခြေတွင်ပေါ်ပေါက်လာသောရေကို unpolymerized acrylamide နှင့်ရေကိုဆေးကြောပါ။ ရေနမူနာအပေါက်ကိုသိသိသာသာသေးငယ်စေနိုင်သည်။ 25 မီလီမီတာသို့မဟုတ် 50ml ပြွတ်နှင့် 18-gauge အပ်ကိုသုံးပါ။ Electrophoresis Buffer အတွက်သွန်းလောင်းနှင့်နမူနာနမူနာအပေါက်ကို spush ။
·နမူနာအပေါက်ကိုကြည့်ရန်ခက်ခဲသည်, သို့သော်အတူတူပင်ကျန်သည်လွယ်ကူသည်။ ပိုလျှံသောတွင်းများရှိပါကနမူနာကြားခံကို Bromophhenol အပြာရောင်ဖြင့်စမ်းသပ်နိုင်သည်။
Post Time: Mar-31-2023